Analiza jakościowa dla WZW typu C

Share Tweet Pin it

Pozostaw odpowiedź

Jakościowa analiza reakcji łańcuchowej polimerazy - PCR w przypadku wirusowego zapalenia wątroby typu C określa obecność lub brak obecności HCV w organizmie. W laboratorium badana jest struktura RNA, w którym zlokalizowany będzie wirus. W przypadku wykrycia wirusa C konieczne jest poddanie się kuracji, ponieważ zaniedbany stan wątroby powoduje poważne następstwa. Jakościowy PCR przeprowadza się po odzyskaniu, aby potwierdzić brak przeciwciał. Mianowany i do badań profilaktycznych. Przy niskim stężeniu patogenu we krwi, PCR (jakościowo) nie może niczego wykryć, ponieważ system diagnostyczny ma swoje progi czułości. W przypadku początkowego stadium choroby lub łagodnej postaci PCR ostatecznie diagnozuje się za pomocą ultraczułego sprzętu.

Co to jest wirus RNA?

Termin RNA wirusa zapalenia wątroby typu C (lub RNA wirusa zapalenia wątroby typu C) jest nazywany chorobą wątroby. Wirus C wiąże się ze zdrową komórką organizmu, przenikając do wnętrza. Z czasem rozprzestrzeniają się po całym ciele, tylko po to, aby dostać się do krwi. W rezultacie patogen przenika do wątroby, łączy się z komórkami i ciężko pracuje. Komórki wątrobowe (hepatocyty) działają pod jej wpływem, ulegając zmianom, i od tego powodu. Im dłużej wirus C znajduje się w wątrobie, tym więcej komórek umiera. Z czasem rozwijają się niebezpieczne choroby prowadzące do złośliwej degeneracji i śmierci.

Zakażenie wątroby tym typem wirusa nie może być w żaden sposób ujawnione zewnętrznie. Przez wiele lat lub kilkadziesiąt lat zarażona osoba czuje się całkowicie zdrowa, a tylko przypadkowe badanie najczęściej ujawnia patologię. Przekazując krew na zapalenie wątroby, badana jest część łańcucha RNA (kwasu rybonukleinowego), który jest częścią ludzkiego genu (DNA). Wyniki badań laboratoryjnych nie powinny być wykorzystywane do samodzielnego leczenia, ponieważ jest to tylko wskaźnik. Lekarz określi dokładny obraz i dalszą diagnostykę.

Po zakończeniu: świadectwo badania

W celu potwierdzenia HCV przypisano analizę PCR (reakcję łańcuchową polimerazy). Badania PCR pomagają znaleźć materiał patogenu w strukturze RNA i zalecić skuteczną terapię. Mianowany w następujących przypadkach:

  • identyfikacja objawów zapalenia wątroby;
  • badania przesiewowe pod kątem zapobiegania;
  • badanie osób w kontakcie;
  • rozpoznanie zapalenia wątroby o pochodzeniu mieszanym (definicja głównego patogenu);
  • Określanie poziomu aktywności reprodukcji wirusa w postaci przewlekłej;
  • marskość wątroby;
  • w celu określenia skuteczności przepisanego leczenia.
Badania PCR są przydzielane przez lekarza w celu określenia skuteczności leczenia zapalenia wątroby.

Istnieje zarówno jakościowa, jak i ilościowa analiza PCR. Ilościowa reakcja PCR pokazuje odsetek RNA u nosicieli wirusa we krwi, a jakościowy PCR wskazuje na obecność wirusa lub jego brak. Dodatni wskaźnik jakości (obecność RNA wirusa zapalenia wątroby typu C) również wymaga badania ilościowego. Wysoki poziom stężenia patogenu zapalenia wątroby typu C wiąże się z ryzykiem przeniesienia, to znaczy zakażenia innych. Niskie ilości są lepiej traktowane. Ilość wirusów RNA we krwi nie jest związana z intensywnością choroby. Analiza PCR jest również przeprowadzana w przypadku terapii interferonem, w celu określenia czasu trwania i złożoności przebiegu leczenia.

Cechy jakościowej analizy PCR dla zapalenia wątroby typu C

Jakościowa analiza z indeksem reakcji łańcuchowej polimerazy jest przypisana wszystkim pacjentom, którzy mają we krwi przeciwciała przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu C. Kto wyzdrowiał i wyzdrowiał, powinien być ponownie przetestowany. Zaleca się przeprowadzenie analizy dotyczącej zapalenia wątroby typu B, a następnie, w przypadku pozytywnego wniosku, oraz na temat zapalenia wątroby typu D. Analizę jakościowo analizowaną należy przeprowadzić w połączeniu z innymi badaniami krwi. Analizy pokażą pełny obraz rozprzestrzeniania się wirusa.

Z wyników testu będzie widoczny tylko pozytywny test na zapalenie wątroby typu C lub negatywny, czyli obecność lub brak wirusa. Jeśli wniosek zostanie "wykryty", wirus jest i nadal aktywnie działa. Oznaczenie "nie znaleziono" wskazuje na brak wirusa lub jego niewielką ilość. Za pomocą tego wskaźnika należy wziąć pod uwagę fakt, że wrażliwość analityczna systemów diagnostycznych jest różna, a wirusowe zapalenie wątroby typu C może nadal znajdować się we krwi, ale nie ujawnia się w analizie.

Szczególnie wrażliwa metoda PCR ultra-zapalenia wątroby typu C ujawnia się nawet w niewielkich ilościach. Zastosowano badanie hybrydyzacyjno-fluorescencyjne, które jest wielokrotnie wyższe niż standardowe systemy PCR. Metodę stosuje się w kilku przypadkach:

  • podejrzewane ukryte postacie zapalenia wątroby typu C;
  • Rozpoznanie PCR nie zostało potwierdzone przez patogen, ale są przeciwciała;
  • w przypadku odzysku;
  • zidentyfikować wczesny etap infekcji.
Powrót do spisu treści

Wyjaśnienie analizy

Ostateczna decyzja w diagnozie jest zależna od dekodowania PCR HCV, w szczególności za pomocą ultrasonografii. Główną wadą tego badania jest ścisłe przestrzeganie sterylnych warunków dla próbki i materiałów. Niewielkie odchylenie pokazuje czasem niedokładne wnioski analityka, komplikuje diagnozę i późniejsze leczenie. Analiza PCR w celu oznaczenia RNA wirusa zapalenia wątroby nie zawsze pokazuje obraz choroby z pewnością, czasami niedokładności są dopuszczalne, na dwa sposoby.

Diagnozując wirus zapalenia wątroby, zaleca się złożenie kompleksowego badania.

Norma wskaźników

Brak przeciwciał przeciwko JgM w stosunku do RNA w wirusowym zapaleniu wątroby typu C jest uważany za normę w analizie reakcji łańcuchowej polimerazy. Jednocześnie wyniki analizy serologicznej wskazują na obecność przeciwciał przeciwko wirusowi C, co również mieści się w granicach normy. Definicja jakościowa nie pokazuje intensywności choroby, tylko ujawnia czynnik powodujący zapalenie wątroby typu C w RNA. Taką analizę powtarza się po leczeniu, aby potwierdzić faktyczne odzyskanie.

Odchylenia

Jeśli obecne są przeciwciała JgM przeciwko HCV RNA, oznacza to rozwijającą się infekcję. Choroba jest ostra lub przewlekła, manifestuje się na różnych etapach. Jeśli zanotowano spadek liczby przeciwciał, analiza będzie wskazywać na osiągnięcie wyników leczenia podczas odzyskiwania. Niezwykle rzadkie są przypadki fałszywie dodatnich wyników w diagnozie. Występują u kobiet w czasie ciąży oraz u osób z innymi chorobami zakaźnymi.

Rozpoznanie za pomocą PCR w przypadku zapalenia wątroby typu C

Nie wiadomo, w których stosuje się metodę diagnostyczną reakcję PCR wirusowego zapalenia wątroby typu C. Jednym z najbardziej powszechnych grup chorób są choroby zakaźne układu żołądkowo-jelitowego. Najczęściej cierpią na żołądek (wrzody), jelita (zapalenie okrężnicy, zapalenie jelit) i wątrobę (zapalenie wątroby).

W wątrobie pośród wszystkich wyżej wymienionych narządów największy ciężar jest przypisany. W organizmie rola wątroby jest niezwykle ważna:

  1. Prawie wszystkie reakcje metaboliczne zachodzą w wątrobie (to tutaj tworzą się wszystkie istotne składniki, które pozwalają ciału w pełni funkcjonować).
  2. Wątroba jest głównym narządem, który wykonuje funkcję detoksykacji. Przy jego pomocy (w szczególności poprzez żółć) usuwa się wiele substratów, które mogą powodować zatrucie i prowadzić do poważnych konsekwencji.

Niestety, wiele osób nie podąża za swoim zdrowiem, z powodu tego, co zaczyna cierpieć wątroba. Zwykle rozwija się zapalenie wątroby o różnej etiologii (wirusowe, toksyczne).

Definicja zapalenia wątroby

Wirusowe zapalenie wątroby odgrywa ważną rolę w chorobach wątroby. Nasilenie przebiegu choroby, złożoność leczenia sprawia, że ​​są pierwszymi spośród patologii innej natury tego narządu.

Wszystkie zapalenia wątroby dzielą się na ostre i przewlekłe. W ostre zapalenie wątroby typu A i B. Wśród przewlekłych na pierwszym miejscu jest zapalenie wątroby typu C.

Choroba ta jest wywoływana przez wirus zapalenia wątroby typu C. Cechą charakterystyczną jest to, że choroba może trwać przez długi czas bez żadnych objawów klinicznych.

Jest przenoszony głównie przez krew. Wraz z przepływem krwi wirus wchodzi do wątroby, gdzie zaczyna się namnażać w swoich komórkach. W wyniku nagromadzenia wirionów dochodzi do zniszczenia zainfekowanego hepatocytów. W odpowiedzi zaczynają powstawać przeciwciała, które zaczynają atakować resztki hepatocytów. Z tego powodu z czasem buduje się basen przeciwko komórkom wątroby, co pogarsza przebieg choroby.

Ponieważ choroba jest bezobjawowa lub bezobjawowa, a objawy kliniczne pojawiają się tylko przy znacznym uszkodzeniu komórek, choroba ta wymaga stworzenia metod diagnostycznych w celu zidentyfikowania jej obecności i podjęcia odpowiednich działań.

Diagnoza wirusowego zapalenia wątroby typu C: analizy jakościowe i ilościowe

Obecnie do diagnozowania wirusowego zapalenia wątroby typu C stosuje się takie metody jak biopsja wątroby, immunogram.

Pozwalają bezpośrednio określić obecność zainfekowanych hepatocytów (badanie biopsji wątroby) lub swoiste przeciwciała przeciwko zakażonym komórkom (immunogram). Istnieje jednak metoda, która może wiarygodnie ustalić obecność samego wirusa. Ta PCR jest reakcją łańcuchową polimerazy.

Istota tej metody polega na tym, że w pewnych warunkach następuje rozwój łańcuchów RNA. Wynika to z faktu, że we krwi lub w próbce biopsyjnej znajdują się fragmenty cząsteczki wirusa. Kiedy są połączone z pewnymi cząsteczkami w podłożu, następuje synteza łańcuchów komplementarnych do wirusowego RNA. W ich późniejszej analizie i porównaniu ze znaną sekwencją nukleotydową wirusa zapalenia wątroby typu C można ustalić, czy w organizmie jest dany wirus i czy obecne jest uszkodzenie wątroby.

PCR przeprowadza się po wykryciu swoistych przeciwciał przeciwko wirusowi zapalenia wątroby we krwi. Po teście wynik jest renderowany - RNA "wykryto" lub "nie wykryto". Czasami może powiedzieć "niewystarczająco dużo materiału" - w tym przypadku powtórzona analiza dla WZW typu C.

Jeśli liczba cząstek wirusowych jest mniejsza od minimalnej wymaganej wartości, to można mówić o tym, że wirusowe zapalenie wątroby typu B nie występuje, a minimalna ilość materiału genetycznego można było „mylić”, ponieważ naśladuje materiału genetycznego lub kilku sekwencji nukleotydów, że szansa, że ​​pokrywa się z wirusem.

  1. W PCR wynik ujemny można zaobserwować, gdy w rzeczywistości są cząsteczki wirusowe we krwi, ale są one tak małe (zakażenie miało miejsce niedawno lub analiza była poprzedzona długą i intensywną terapią przeciwwirusową), że system testowy zwyczajnie nie mógł określić ich stężenia normalnie. RNA - "nie wykryto".
  2. Jeśli PCR ma wynik dodatni, jest tak wiele cząsteczek wirusa we krwi, że ich liczba przekracza dolną granicę czułości układu testowego. W takim przypadku ryzyko rozwoju procesu zakaźnego jest wysokie (lub jest już obecne na dość zaniedbanym etapie). Zwykle duża ilość wirusa jest już wskazaniem do leczenia i późniejszego przeszczepienia wątroby.

Czasami test może stać się fałszywie dodatni lub fałszywie ujemny.

Fałszywie ujemny wynik PCR zapalenia wątroby obserwuje się, gdy w medium reakcyjnym znajdują się składniki hamujące tworzenie kopii cząsteczki wirusa. Z tego powodu nie jest możliwe uzyskanie prawdziwego obrazu stanu krwi, który przyczynia się do przejścia wirusa i progresji choroby. Na reakcję może wpływać obecność heparyny we krwi (ze względu na spadek względnej lepkości krwi). Nieprawidłowa interpretacja analizy jest również możliwa, gdy warunki transportu i przechowywania badanego materiału nie zostały spełnione.

Fałszywie pozytywne wyniki, gdy rozpoznano zapalenie wątroby typu C, PCR najczęściej podaje się, gdy probówka testowa lub medium robocze jest skażone. Ponadto, pozytywne wyniki można zaobserwować w obecności i wirusach zapalenia wątroby innych grup (z powodu reakcji krzyżowej).

Jakościowa analiza PCR w celu wykrycia zapalenia wątroby typu C

Obecność we krwi dużej liczby krioglobulin wpływa również bezpośrednio na przebieg reakcji PCR. Z tego powodu, przed testowaniem wirusowego zapalenia wątroby typu C, jest wymagana w celu określenia ich stężenie we krwi w celu wykrywania zakłóceń w wyniku z góry, a jej zapobiec.

Po wykonaniu określonych testów staje się jasne, czy istnieją cząsteczki wirusa krwi. Po ich zdefiniowaniu zaleca się natychmiast rozpocząć terapię przeciwwirusową, aby spowolnić postęp procesu. W przeciwieństwie do wirusowego zapalenia wątroby typu B, nie ma pełnego lekarstwa na zapalenie wątroby typu C; choroba przechodzi tylko w stan utajony i zaczyna płynąć wolniej. Klęska wątroby jest nieunikniona. Na ostatnim etapie procesu, kiedy wątroba nie radzi sobie już z jego funkcją, może być konieczne przeszczepienie.

Leczenie odbywa się głównie za pomocą dwóch leków - interferonu i rybawiryny.

Wykazano ich skuteczność w spowalnianiu procesu uszkodzenia hepatocytów. W międzyczasie konieczne jest podawanie terapii infuzyjnej w celu ułatwienia pracy wątroby.

Wszyscy pacjenci, u których zaobserwowano wzrost liczby cząsteczek wirusa we krwi, są koniecznie na koncie hepatologa. Kilka razy w roku zaleca się przeprowadzenie badań profilaktycznych w celu określenia postępu procesu i szybkiego wykrywania wskazań do transplantacji. Ponadto można używać i hepatoprotektorów, chociaż opinie lekarzy są nieco rozbieżne. Niektórzy uważają, że te leki mogą zatrzymać proces i chronić niezagojone hepatocyty; Inni są przekonani, że nie ma sensu ich przyjmować i że należy prowadzić intensywną terapię przeciwwirusową.

Zatem wirusowe zapalenie wątroby typu C należy do kategorii chorób, których wykrycie stanowi pewne trudności. Poprawa metod diagnostycznych, jak również przeprowadzanie w odpowiednim czasie badań profilaktycznych zmniejszy częstość występowania tej choroby. Ważne jest również zapobieganie tej chorobie. Powinieneś ostrożnie unikać kontaktu z krwią, odmawiać przyjmowania narkotyków, tylko wtedy choroba ta zostanie zlikwidowana. Najważniejsze w zapobieganiu i leczeniu jest świadome podejście pacjenta do jego zdrowia.

Dekodowanie analizy PCR dla zapalenia wątroby typu C

Specjalne badanie laboratoryjne - analiza zapalenia wątroby typu C ptsr - znacznie upraszcza diagnozę tej choroby wirusowej. Wyjątkiem jest nie i wirusowe zapalenie wątroby typu C. Mała próbka krwi może być sprawdzona pod kątem zawartości RNA i innego materiału genetycznego czynnika wirusowego. Analizę za pomocą PCR wykonują wszystkie osoby z przeciwciałami przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu C krążącym w osoczu krwi, których obecność potwierdziła jakościowe wykrycie.

Interpretacja wyników jest interpretowana na wykresie formy badawczej jako analiza "pozytywna" lub "negatywna". Ponadto za pomocą PCR możliwe jest nie tylko jakościowe określenie minimalnej zawartości wirusa, ale także zliczenie liczby cząstek. W ten sposób można określić szacunkowy ładunek wirusa i określić tak dokładnie, jak to możliwe medyczną taktykę leczenia.

Wirusowe uszkodzenie wątroby

Wątroba jako element przewodu pokarmowego nabiera ogromnego obciążenia. W jego komórkach zachodzi większość reakcji metabolicznych wszystkich typów metabolizmu, co zapewnia optymalne funkcjonowanie wszystkich narządów i układów. Jednocześnie jego wartość odtruwająca jest doskonała do usuwania żużli i produktów przemiany materii z fermentującą żółcią.

Pokonanie wątroby przez wirusy o różnej naturze jest niezwykle niebezpieczne dla narządu. Różnorodność obrazu klinicznego i nieprzestrzeganie leczenia zapalenia wątroby prowadzi do pierwszego miejsca pod względem zagrożeń dla zdrowia. Wirusowe zapalenie wątroby typu C jest przewlekłe i może dawać negatywny wynik testu przez długi czas, powoli pasożytując na ludzkim ciele. Wirus jest przenoszony przez płyny biologiczne: krew i rzadziej przez plemniki. Narkotyczne nadużywanie niesterylnych strzykawek, naturalna dostawa zarażonych kobiet, przypadkowe zranienia lub cięcia pracowników służby zdrowia mogą prowadzić do przeniesienia wirusa na zdrowych ludzi.

Szybka diagnoza choroby jest utrudniona przez ukryty obraz kliniczny i niesystematyczną patologię. Pozytywny wynik można po prostu pominąć w testach niskiej jakości. Tylko znaczące uszkodzenie komórek wątroby powoduje pewną symptomatologię, jednak negatywny wpływ wiremii nie pozostawia w tym czasie szansy na przywrócenie narządu.

Współczesna medycyna opracowała specjalne metody rozpoznawania najmniejszego śladu wirusa. PCR, ifa, biopsja wątroby może wykryć najmniejsze uszkodzenie wątroby i minimalny poziom przeciwciał przeciwko wirusowi. Analiza za pomocą PCR jest najprostszą i najbardziej niezawodną praktyką diagnostyczną.

Analiza jakościowa

Istotą reakcji polimerazy jest opracowanie sekwencji RNA. Reakcję przeprowadza się, gdy w osoczu krwi znajdują się te same białka wirusowe.

Specjalne katalizatory umożliwiają syntezę podobnej wirusowej sekwencji łańcuchowej, która jest porównywana ze znanymi nukleotydami wirusowego RNA. Na tej podstawie określa się obciążenie wirusowe i uszkodzenie wątroby.

PCR jest w stanie wykryć nawet pojedynczą obecność pożądanego genu w pobranej krwi. Ta reakcja łańcuchowa diagnostyczna jest również bardzo specyficzna. Sekwencja łańcuchów nukleotydowych jest unikalna dla każdego stworzenia, tak że enzymatyczne startery tworzą identyczne sekwencje pożądanej informacji genetycznej. W związku z tym każdy wirus może zostać wykryty z najmniejszą dokładnością, nawet jeśli jego wskaźnik ilościowy jest bardzo mały.

U pacjentów, u których wykryto rozwinięte przeciwciała przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby, przeprowadzono badanie jakościowe ptsr lub ifa. Wynik analizy może być pozytywny lub negatywny, co w obu przypadkach wymaga leczenia.

Rozszyfrować pozytywną odpowiedź reakcji łańcuchowej następuje jako obecność fragmentów RNA wirusa zapalenia wątroby lub jako zjawisko infekcji.

W osoczu krwi w tym momencie wirus aktywnie rozmnaża się i pasożytuje w komórkach wątroby. Diagnostyka PCR może dać odpowiedź negatywną, jeśli cząsteczki wirusowego RNA są obecne w plazmie nieco poniżej poziomu czułości testu lub w ogóle nie występują. Po bezpośredniej infekcji ilość wirusa rośnie stosunkowo wolno i dopiero po 1-2 tygodniach można go odróżnić, jeśli lub inne badania jakościowe.

Analizę negatywną można uzyskać w następujących przypadkach:

  1. Podczas pobierania materiału w niewłaściwych warunkach, pobranie próbki krwi z zanieczyszczeniem;
  2. Przy wcześniejszych wstrzyknięciach heparyny pacjenta.
  3. Gdy w pobieranych próbkach obecne są inne enzymy i substraty, które zakłócają przebieg reakcji łańcuchowej.

Analiza ilościowa

Badanie ilościowe jako diagnostyka mikrobiologiczna ma na celu określenie miana wirusa. Potwierdzona analiza jakościowa wiremii jest podstawą do określenia ilości materiału genetycznego i jego stężenia. Liczbę wykrytych wirusowych RNA określa się w jednostce objętości krwi, zwykle w 1 mililitrze. Wymagane materiały są wyrażone w międzynarodowych jednostkach, niektóre laboratoria analizują, czy używają liczby kopii.

Zwykle przed każdym schematem terapeutycznym przeprowadza się ilościową analizę PCR. Wirusowe RNA są zliczane dość często: po jednym, czterech, dwunastu i dwudziestu czterech tygodniach. Dwunasty tydzień jest uważany za orientacyjny, ponieważ na podstawie analizy przeprowadzonej w tym okresie dokonuje się dekodowania skuteczności środków medycznych.

Analiza ilościowa za pomocą PCR lub jeśli polega na pobieraniu próbek z żyły.

Interpretacja wyników jako wysokiego miana wirusa rozpoczyna się od wartości 800 000 IU / ml. Taki pozytywny wynik w przypadku zapalenia wątroby typu C odzwierciedla obecność co najmniej 3 000 000 kopii w jednym mililitrze krwi. Niski poziom wiremii zatrzymuje się na poziomie 400 000 IU / ml. Wyniki badania mogą być wartościami jako odpowiedź negatywna, a także "poniżej zakresu pomiarowego".

Badanie ilościowe z oceną "poniżej zakresu pomiarowego" mówi, że reakcja nie obliczyła RNA. Wirus krąży w ciele, o czym świadczy pozytywny test jakościowy. Negatywny wskaźnik ilościowej analizy ptsr lub ifa wskazuje na brak RNA w tej próbce krwi.

Pomimo ograniczonych sposobów przenoszenia wirusa przez krew, wzrasta ryzyko przeniesienia wirusa przez sekrety gonad, z matki na dziecko.

Analiza ilościowa zapewnia znaczącą pomoc w ocenie interwencji terapeutycznych. Ifa i ptsr odzwierciedlają działanie leków antywirusowych, pomagają ustalić czas terapii i oceniają powstawanie odporności u pacjentów. Wczesna odpowiedź negatywna z testów laboratoryjnych wskazuje na skuteczne leczenie i konieczność skrócenia czasu leczenia. Powolny spadek współczynników wiremii można odczytać jako konieczność modyfikacji przebiegu terapeutycznego. Poziom wiremii determinuje rokowanie choroby. Wirusowe zapalenie wątroby o niskim wskaźniku jest najprawdopodobniej po prostu leczone i może całkowicie usunąć wirus z organizmu. Wysokie wskaźniki obecności wirusa we krwi wymagają uważnego leczenia i wszechstronnego leczenia.

Jakościowa i ilościowa analiza PCR dla zapalenia wątroby typu C: negatywna, pozytywna, dekodowanie

Wirusa zapalenia wątroby typu C - wirusowe choroby wątroby spowodowane przez HCV flawiwirusowych, w której struktura zawiera cząsteczki kwasu rybonukleinowego (RNA) (od angielskiego wirusa zapalenia wątroby typu C.). RNA przenosi kod genetyczny wirusa. Jego obecność pozwala na analizę PCR pod kątem zapalenia wątroby typu C.

HCV jest niebezpieczny dla ludzi i że tak zwane okienko serologiczne (czas między zakażeniem a pojawieniem się reakcji przez system immunologiczny) może być dość długi - od kilku tygodni do sześciu miesięcy.

To nie ujawnia infekcji i nie rozpoczyna leczenia na czas.

W zależności od indywidualnych cech organizmu gospodarza, HCV może przejawiać się w postaci ostrej, a także może rozwinąć się jako choroba przewlekła, wymagająca długotrwałego i kosztownego leczenia. Podczas wykrywania przeciwciał przeciw HCV wykonuje się szereg testów laboratoryjnych, w tym PCR na zapalenie wątroby typu C. Test ten przeprowadza się dla wszystkich osób, u których znaleziono przeciwciała przeciwko HCV.

Czym jest analiza PCR?

Analiza laboratoryjna PCR dla zapalenia wątroby typu C - badanie materiału biologicznego w celu identyfikacji obecności flawawirusa.

Łańcuchowa reakcja polimerazy (jako że skrót jest rozszyfrowywany) pokazuje ilościową wartość wirusowego uszkodzenia organizmu, jego jakościową charakterystykę, a także genotyp wirusa zawierającego RNA.

Na ich podstawie, jak również na podstawie dodatkowych analiz, określa się metodę i czas trwania terapii, a także czynnik epidemiologiczny (ryzyko przeniesienia na innego przewoźnika).

Co to jest analiza RNA w przypadku wirusowego zapalenia wątroby typu C?

PCR wirusa zapalenia wątroby typu C nazywany jest również analizą RNA (HCV RNA), ponieważ nie jest znany. Flavavirus zawiera cząstkę RNA o wielkości wirionu 30-60 nm. Jedną z cech tego mikroorganizmu jest wysoka skłonność do mutacji.

Każdy z podgatunków (genotypów) wirusa ma różną oporność, co powoduje różne metody leczenia i charakter dalszego rokowania dla pacjenta.

materiału biologicznego (krwi żylnej) otrzymuje czczo i zazwyczaj testowane przez PCR w czasie rzeczywistym (wrażliwych diagnostyki w czasie rzeczywistym w celu określenia dolnej wartości granicznej 15 IU / ml, stosując tryb automatyczny system zamknięty).

Istnieją inne testy, na przykład COBAS AMPLICOR o czułości 50-100 IU / ml. Dla każdego badania laboratoryjnego ważny jest próg czułości, tj. zdolność odczynnika do wykrywania minimalnego stężenia wirusa w materiale biologicznym.

Rodzaje analiz dla zapalenia wątroby typu C metodą PCR

PCR dla wirusowego zapalenia wątroby typu C obejmuje trzy ważne elementy:

  • analiza jakościowa;
  • analiza ilościowa;
  • genotypowanie.

Testy te mogą określić charakter wiremii, a także genetyczne objawy patogenu. W zależności od czułości systemu diagnostycznego test przeprowadza się raz, a czasami wykonuje się drugi test z bardziej czułym odczynnikiem, aby potwierdzić lub udoskonalić wyniki.

Wysokiej jakości PCR z WZW typu C

Analiza PCR pod kątem jakości zapalenia wątroby typu C jest inną powszechną nazwą testu reakcji łańcuchowej polimerazy. Standardowa czułość testu, która pozwala wykryć obecność wirusowego uszkodzenia, mieści się w zakresie 10-500 IU / ml.

Analiza negatywna PCR wirusa zapalenia wątroby typu C pokazuje, że stężenie wirusa we krwi pacjenta znajduje się poniżej progu podatności systemu diagnostycznego.

Jeżeli jakościowy PCR dał odpowiedź "niewykrywaną", wówczas dla następnego leczenia ważne jest poznanie progu wrażliwości odczynnika.

Frakcje białek do flawawirusa pojawiają się znacznie później.

Ilościowy PCR wirusa zapalenia wątroby typu C

Ilościowe oznaczenie ilościowe zapalenia wątroby typu C w PCR jest wskaźnikiem obciążenia wirusowego, które odzwierciedla poziom stężenia RNA flawawirusa w organizmie. Jest to wskaźnik pokazujący ile fragmentów wirusowego RNA znajduje się na jeden centymetr sześcienny krwi. PCR RNA zapalenia wątroby typu C, wyniki badań ilościowych w konwencjonalnym układzie przedstawiono w jednostkach międzynarodowych na ml (IU / ml) i mogą być rejestrowane w inny sposób, na przykład - 1,7 ppm lub 1.700.000 IU / ml.

Ilościową diagnostykę PCR zapalenia wątroby C podaje się pacjentom przed rozpoczęciem leczenia przeciwwirusowego, aw 12. tygodniu leczenia ocenia się wyniki wybranej metody zwalczania HCV. Obciążenie wirusem pozwala zidentyfikować trzy ważne wskaźniki choroby:

  • infekcyjność, tj. stopień ryzyka przeniesienia wirusa z jednego nośnika na inny (im wyższe stężenie RNA wirusa flawawirusów, tym większe prawdopodobieństwo zarażenia innej osoby, na przykład podczas kontaktu seksualnego);
  • metoda i skuteczność leczenia;
  • czas trwania i rokowanie terapii przeciwwirusowej (im wyższe jest obciążenie wirusem, tym dłużej trwa leczenie).

Ilościowa diagnostyka PCR wirusowego zapalenia wątroby typu C zależy od rodzaju testu laboratoryjnego i progu jego czułości. Dolną granicę normy uważa się zwykle za 600 000 IU / ml, średnia wartość mieści się w zakresie 600 000-700 000 IU / ml. Wyniki z 800 000 IU / ml i powyżej uważa się za wysokie poziomy wirusa zawierającego RNA.

Genotypowanie

Ze względu na wysoką aktywność mutacyjną HCV ważne jest ustalenie na etapie testowania, który genotyp wirusa znajduje się w krwi pacjenta. W sumie na planecie zapisanych jest 11 genotypów wirusa zapalenia wątroby typu C, które obejmują wiele podgatunków. Na terytorium Federacji Rosyjskiej, 1,2 i 3 są powszechne.

RNA RNA wirusa zapalenia wątroby typu C wraz z genotypowaniem jest bardzo ważnym elementem analizy, ponieważ pozwala lekarzowi określić oporność (odporność) wirusa, wybrać odpowiednie leki i przepisać przebieg leczenia.

Genotypowanie pozwala również pośrednio określić stan wątroby. Na przykład 3 genotypowi HCV często towarzyszy stłuszczenie, w którym tłuszcz gromadzi się w komórkach ciała.

Badanie krwi dla PCR w wirusowym zapaleniu wątroby typu C powinno dać liczbę określającą genotyp. W odpowiedziach laboratoryjnych można napisać "nie wpisany" - oznacza to, że w krwi ludzkiej występuje wirus, którego nie określa system testowy. Może to wskazywać, że genotyp jest nietypowy dla danego obszaru geograficznego. W takim przypadku konieczne jest ponowne przeprowadzenie analizy z wyższą czułością systemu diagnostycznego.

Dekodowanie analizy PCR dla zapalenia wątroby typu C

Test na PCR wirusa zapalenia wątroby typu C można określić ilościowo na podstawie powyższych danych. Po otrzymaniu wyników badań laboratoryjnych zwykle zapisuje się następujące dane:

  • "Znaleziono" / "nie znaleziono" (wysokiej jakości PCR dla wirusowego zapalenia wątroby typu C);
  • ilość frakcji zawierających RNA, na przykład 831,680 jm / ml (ilościowy test PCR);
  • liczba określająca genotyp HCV, na przykład - 1, 2, 3, 4;
  • nazwa testu jest najczęściej w czasie rzeczywistym.

Najważniejszym w rozszyfrowaniu analizy PCR dla zapalenia wątroby typu C jest druga pozycja, która pokazuje obciążenie wirusowe określające rokowanie, metodę i czas trwania leczenia.

Jeśli analiza PCR w przypadku zapalenia wątroby typu C jest ujemna, a wynik testu ELISA pozytywny - co to oznacza?

Aby rozszyfrować testy laboratoryjne, należy skontaktować się z hepatologiem lub specjalistą chorób zakaźnych, który wyjaśni otrzymane informacje zgodnie z rodzajem systemu diagnostycznego i progiem jego czułości. W praktyce medycznej istnieje wiele danych z badań krwi, które mogą doprowadzić do zamieszania u osoby nieposiadającej wykształcenia medycznego.

Na przykład, test na HCV PCR pozytywnych i negatywnych w teście ELISA, może to oznaczać, że w tym czasie w krwi pacjenta nie HCV, ale przed doznał ostrą postać zapalenia wątroby typu C. Uważa się, że dodatni test immunoenzymatyczny (ELISA), pokazuje, że we krwi znajdują się przeciwciała wyprodukowane po inwazji wirusa w przeszłości. Ale w nowoczesnej praktyce medycznej analiza ELISA nie jest wystarczająco wiarygodne i często daje niezwykłe rezultaty, więc lekarze stosują go jako podstawowego badania przesiewowego. Podczas diagnozowania choroby specjaliści kierują się dokładnie testami PCR.

Przydatne wideo

W poniższym filmie bardzo szczegółowe i interesujące jest stwierdzenie, co jest istotą metody PCR, w jaki sposób przeprowadza się analizę:

Wniosek

Krew żylną pobierano zwykle do analizy PCR wirusa zapalenia wątroby typu C. Najczęściej występuje podwójne pobieranie próbek materiału biologicznego - do testu ELISA i bezpośrednio do testu PCR. Aby uzyskać prawidłowe wyniki badań, wymagana jest zgodność z głównymi zasadami pobierania próbek laboratoryjnych materiału biologicznego:

  • krew do analizy podaje się rano na pusty żołądek;
  • pomiędzy jedzeniem a przyjmowaniem krwi powinno trwać co najmniej 8 godzin;
  • Przed przystąpieniem do testu należy również wykluczyć alkohol i smażone potrawy;
  • W ciągu dnia przed oddaniem krwi musisz unikać dużego wysiłku fizycznego.

Wyniki badań krwi są zwykle gotowe następnego dnia.

Badanie PCR dla zapalenia wątroby typu C: rodzaje, wskazania, transkrypt

Wirusowe zapalenie wątroby typu C jest poważną chorobą, która występuje z uszkodzeniem wątroby. U osiemdziesięciu procent pacjentów przechodzi w postać przewlekłą. Wirus mnoży się w komórkach wątroby - hepatocytach - i powoduje ich śmierć. Martwa tkanka zastępowana jest ogniskami tkanki łącznej, rozwija się włóknienie.

Wraz z rozwojem włóknienia wątroby jest w stanie wykonywać swoją funkcję, zaczyna marskości, co jest niebezpieczne dla jej powikłań: zwiększenie ciśnienia w żyle wrotnej, krwawienie z przewodu pokarmowego, zaburzenia krzepnięcia krwi, zmiany psychiczne z powodu uszkodzenia mózgu jąder produktów toksycznych.

Przyczyną choroby jest zakażenie wirusem z rodziny Flaviviridae, który jest rodzajem wirusa RNA. Oznacza to, że materiał genetyczny, z którego syntetyzowane są białka patogenu, jest kodowany w cząsteczce kwasu rybonukleinowego. Zakażenie występuje poprzez krew, płciowo i od kobiety w ciąży do płodu. Niestety, między zakażeniem a początkiem produkcji przeciwciał może upłynąć dość dużo czasu - od dwóch tygodni do sześciu miesięcy. To nie pozwala na ustalenie infekcji metodą immunoenzymatyczną i rozpoczęcie leczenia we wczesnych stadiach.

Czym jest analiza PCR?

PCR to metoda analizy molekularnej, która umożliwia wykrywanie materiału genetycznego patogenu już w pierwszym tygodniu po zakażeniu stosując reakcję łańcuchową polimerazy. Badanie ma wysoką specyficzność, dokładność i pozwala nie tylko określić obecność lub nieobecność wirusa, ale także jego stężenie i genotyp.

Do badania weź krew pacjenta, w której potencjalnie można znaleźć RNA wirusa. Krew dodaje starterów - sztucznie syntetyzować krótkie odcinki o długości żądanego genu i polimerazy RNA - szczególny enzym, który mnoży się ilość materiału genetycznego patogenu. Za pomocą specjalnego urządzenia wykonuje się kilka cykli ogrzewania i chłodzenia. Materiał jest następnie analizowany i porównywany ze znanymi genami wirusa, na podstawie których wysuwany jest wniosek dotyczący obecności lub braku infekcji.

Rodzaje analizy PCR dla zapalenia wątroby typu C

Istnieją trzy rodzaje analizy PCR:

  1. Jakościowa analiza PCR. Pierwszy etap badania. Pozwala zidentyfikować materiał genetyczny wirusa we krwi.

  • Ilościowa analiza PCR. Pozwala określić obciążenie wirusowe - stężenie materiału genetycznego patogenu w jednym mililitrze krwi. Badanie to przeprowadza się przed rozpoczęciem terapii, a następnie na pierwszym, czwartym, dwunastym i (jeśli przebieg jest długi) dwudziestym czwartym tygodniu leczenia w celu oceny jego skuteczności.

  • Genotypowanie. Czynnik powodujący zapalenie wątroby typu C często i szybko mutuje. Na planecie znaleziono siedem wariantów genotypu tego wirusa. W Rosji pierwsze, drugie i trzecie typy są powszechne. Każdy z genotypów ma różną odporność na terapię, na przykład skuteczność leczenia pierwszego typu wynosi sześćdziesiąt procent, a dla drugiego i trzeciego osiąga osiemdziesiąt pięć. Dlatego w celu dobrania odpowiednich leków i przepisania przebiegu leczenia o wystarczającym czasie, konieczne jest dokładne ustalenie, jaki rodzaj wirusa pacjent jest zakażony.
  • Wskazania do analizy PCR dla zapalenia wątroby typu C

    Badanie PCR jest zalecane w następujących przypadkach:

    • kontakt z chorym, który może prowadzić do zakażenia;
    • pozytywny test immunologiczny związany z enzymem;
    • objawy marskości wątroby: zmiany w wielkości wątroby, powiększenie śledziony, pojawienie się podskórnego splotu żylnego na brzuchu;
    • pojawienie się objawów uszkodzenia wątroby: ból po prawej stronie brzucha, zażółcenie skóry;
    • zwiększona aktywność ALT i AST w biochemicznej analizie krwi;
    • przed rozpoczęciem leczenia w celu ustalenia miana wirusa;
    • monitorować skuteczność terapii przeciwwirusowej;
    • po zakończeniu leczenia w celu monitorowania nawrotu;
    • w obecności zdiagnozowanego zapalenia wątroby typu B, w celu wykluczenia mieszanego uszkodzenia wątroby.

    Dekodowanie badania PCR na zapalenie wątroby typu C

    Dekodowanie analizy PCR i testu immunoenzymatycznego na zapalenie wątroby typu C powinno być skierowane przez specjalistę hepatologa lub specjalistę od chorób zakaźnych. Analiza wyników PCR jest konieczna w połączeniu z biochemicznym testem krwi, biopsją i USG. Tylko wykwalifikowany lekarz będzie mógł analizować wyniki badań i na ich podstawie zalecać właściwe leczenie.

    Dekodowanie analizy jakościowej.

    Materiał genetyczny patogenu stwierdzono w analizowanym materiale biologicznym. Zakażenie zostało potwierdzone.

    Nie ma infekcji lub ilość RNA patogenu jest poniżej granicy czułości.

    Dekodowanie analizy ilościowej.

    Normalna postać dla zdrowych ludzi. Oznacza to, że w materiale testowym nie ma RNA wirusa zapalenia wątroby typu C lub jego stężenie jest poniżej progu czułości badania.

    Stężenie RNA jest poniżej zakresu oznaczania ilościowego. Takie wyniki są interpretowane bardzo ostrożnie, korelują je z danymi z innych badań, często przeprowadzają drugie badanie.

    Poziom wiremii przy danym stężeniu uważa się za niski. Zwykle zmniejszenie ilości wirusa oznacza, że ​​terapia zakończyła się powodzeniem.

    Więcej niż 8 * 10 ^ 5 IU / ml

    Poziom wiremii przy danym stężeniu uważa się za wysoki.

    Więcej niż 2,4 * 10 ^ 7 IU / ml

    Ilość RNA znajduje się powyżej górnej granicy zakresu kwantyfikacji. Nie można wnioskować o stopniu obciążenia wirusem z tym wynikiem. Zwykle w takich przypadkach test powtarza się z rozcieńczeniem próbki krwi.

    Dekodowanie genotypowania.

    Wykryto RNA o określonym genotypie

    W biomateriałach wirus zapalenia wątroby typu C wykrywa określony genotyp i podtyp. Wynik jest kodowany cyframi rzymskimi i literami łacińskimi, na przykład - 1a, 2b. Istnieje siedem genotypów i sześćdziesiąt siedem podtypów, ale w Rosji istnieją tylko trzy pierwsze typy.

    Wykryto RNA wirusa zapalenia wątroby typu C

    We krwi RNA znaleziono rzadki genotyp dla Rosji, którego nie można przypisać pierwszemu, drugiemu lub trzeciemu rodzajowi. Potrzebne są dalsze badania.

    Wynik ten wskazuje, że pacjent jest zdrowy lub że poziom RNA patogenu jest zbyt mały.

    Sytuacja jest możliwa, gdy analiza PCR dla zapalenia wątroby typu C jest negatywna, a test immunologiczny enzymu wykrywa przeciwciała przeciwko wirusowi. Oznacza to, że pacjent miał zapalenie wątroby typu C w ostrej postaci i leczył się. Około dwudziestu przypadków infekcji powoduje spontaniczne wyleczenie, jeśli organizm pacjenta wykazuje wystarczającą odporność na infekcje.

    Pomimo tego, że PCR jest bardzo dokładną analizą, jej wyniki mogą być zniekształcone w następujących sytuacjach:

    • krew została przetransportowana do laboratorium w niewystarczających warunkach, naruszono reżim temperatur;
    • próbka biomateriału była skażona;
    • we krwi pozostały śladowe ilości heparyny i innych antykoagulantów;
    • W badanej substancji znajdowały się inhibitory - substancje, które spowalniają lub zatrzymują reakcję łańcuchową polimerazy.

    Zalety PCR nad innymi metodami

    1. Diagnoza na wczesnym etapie. PCR wykrywa materiał genetyczny czynnika wywołującego chorobę. Za pomocą analizy immunofluorescencyjnej można określić tylko immunoglobuliny - substancje, które organizm wytwarza w odpowiedzi na infekcję. W przypadku zakażenia wirusem zapalenia wątroby typu C przerwa między zakażeniem a wystąpieniem odpowiedzi immunologicznej może wynosić kilka tygodni i miesięcy, w którym to czasie test ELISA będzie nieskuteczny. PCR da odpowiedź już w pierwszym tygodniu po infekcji.

  • Niskie prawdopodobieństwo błędu. W badanym materiale określa się materiał genetyczny, który jest charakterystyczny tylko dla jednego rodzaju patogenów. Dzięki temu możesz wykluczyć fałszywe wyniki. Dzięki ELISA możliwe są błędy, ponieważ ten sam rodzaj przeciwciał może być uwalniany przeciwko różnym wirusom - takie przeciwciała są nazywane reakcjami krzyżowymi.

  • Wysoka czułość. PCR może wykryć RNA patogenu nawet w minimalnych ilościach. Umożliwia to identyfikację ukrytych infekcji.
  • Jak przygotować się do dostarczenia krwi do badania PCR

    Do analizy PCR pobrano krew żylną z powodu zapalenia wątroby typu C. Zwykle dwie porcje krwi są pobierane z żyły pacjenta na raz: pierwsza jest wysyłana do PCR, a druga do testu ELISA. Odbywa się to w celu dokładniejszej oceny, jak bardzo pacjent jest zarażony wirusem i jak odporność przeciw nim walczy.

    Zwykle wymagane są następujące zasady dotyczące pacjenta:

    • badanie krwi jest wykonywane rano;
    • przerwa między ostatnim posiłkiem a dostarczeniem krwi powinna wynosić od ośmiu do dziesięciu godzin;
    • dwa lub trzy dni przed analizą należy zrezygnować ze smażonych i tłustych potraw oraz alkoholu;
    • na dwadzieścia cztery godziny przed analizą pacjent powinien unikać wysiłku fizycznego: nie nosić ciężarów, nie chodzić na siłownię lub basen.

    Jakościowa analiza PCR dla zapalenia wątroby typu C

    Wirusowe zapalenie wątroby jest poważną chorobą, która ma wiele przyczyn na początku. Sercem rozwoju jest bezpośrednie lub pośrednie uszkodzenie wątroby. Biorąc pod uwagę jego znaczenie dla całego organizmu, można jedynie zgadywać, jak zła jest patologia. W tym artykule omówimy bardziej szczegółowo cechy kursu i diagnostykę laboratoryjną wirusowego zapalenia wątroby typu C.

    Przyczyną choroby jest czynnik wirusowy, który odnosi się do patogenów zawierających RNA. Ma charakterystyczną cechę - zdolność do mutowania, to znaczy do zmiany swojej struktury. Z tego powodu infekcja wymyka się atakowi układu odpornościowego iw większości przypadków prowadzi do przewlekłego stanu zapalnego w wątrobie.

    Biorąc pod uwagę istnienie różnych podtypów wirusa, wybór leków powinien być prowadzony z uwzględnieniem wyników genotypowania. Pomimo długiego badania choroby i specyfiki struktury HCV, nie było możliwe opracowanie specyficznej szczepionki przeciwko tej chorobie.

    Trudności z wczesną diagnozą dotyczą bezobjawowego przebiegu zapalenia wątroby, czego skutkiem jest zwrócenie się do lekarza na etapie marskości. W celu wykrycia choroby na czas wymagane są regularne badania fizyczne. Tylko dzięki laboratoryjnym testom krwi można zidentyfikować HCV i zapobiegać infekcjom innych. Fakt, że nosiciel infekcji może przez długi czas nie wiedzieć o patologii i kontynuować przekazywanie wirusa zdrowym ludziom.

    Ścieżki transmisji

    W większości przypadków wirus rozprzestrzenia się przez krew, ponieważ zawiera największe stężenie czynników chorobotwórczych. W ten sposób infekcja jest przenoszona:

    • z hemodializą;
    • podczas nakłuwania igłą;
    • w trakcie walki, gdy skóra jest zraniona, i pojawia się hemocontact;
    • z transfuzją krwi (transfuzją krwi).

    Prawdopodobieństwo infekcji w intymnej bliskości jest niewielkie, ponieważ nasienie i wydzielina z pochwy zawierają niewielką liczbę patogenów. Ryzyko zakażenia wzrasta znacznie, jeśli naruszona zostanie integralność błony śluzowej narządów płciowych. Obserwuje się to w przypadku agresywnego i analnego seksu.

    W odniesieniu do pionowego sposobu przenoszenia infekcji, odbywa się to w procesie porodu. W okresie ciąży patogen nie może przeniknąć przez łożysko do zarodka. W typach naturalnych czynnik chorobotwórczy przenosi się na dziecko podczas urazu skóry, gdy obserwuje się kontakt z krwią matki.

    Po wniknięciu patogenu do zdrowego organizmu rozpoczyna się synteza przeciwciał, które stanowią ochronę przed infekcją i należą do struktur odpornościowych. Można je znaleźć podczas wstępnego badania osoby za pomocą testu ELISA.

    Aby potwierdzić diagnozę, pacjent przechodzi łańcuchową reakcję polimerazy. Jest to analiza mająca na celu identyfikację materiału genetycznego czynnika chorobotwórczego i określenie miana wirusa.

    Diagnostyka laboratoryjna zapalenia wątroby typu C

    Diagnostyka laboratoryjna rozpoczyna się od testu immunoenzymatycznego. Jego głównym zadaniem jest wykrywanie przeciwciał wytwarzanych przeciwko patogenowi. Jego sprawność wynosi prawie 95%. Dzięki tym badaniom na etapie przedklinicznym możliwe jest zidentyfikowanie nosiciela wirusa i wysłanie go do dalszego badania.

    Jakościowa analiza ELISA wskazuje na obecność lub brak immunoglobulin we krwi pacjenta. Jego wynik może być "pozytywny" lub "negatywny". Po otrzymaniu pierwszego wariantu odpowiedzi, osoba przechodzi do następnego badania - PCR. Jego cena zależy od jakości odczynników i laboratorium. Koszt reakcji łańcuchowej polimerazy może osiągnąć 4000 rubli.

    Funkcje PCR

    Dzięki reakcji łańcuchowej polimerazy nawet niewielka ilość materiału biologicznego umożliwia oszacowanie miana wirusa we krwi, to znaczy obliczenie stężenia patogenów w jednym mililitrze cieczy.

    Wraz z pojawieniem się PCR, rozpoznanie zapalenia wątroby było znacznie prostsze. Analiza umożliwia identyfikację HCV RNA, aby ustalić etap procesu zakaźnego i infekcyjność nosiciela wirusa.

    Istnieje kilka rodzajów diagnostyki genetycznej:

    1. analiza jakościowa PCR dla zapalenia wątroby typu C - potwierdza obecność lub brak obecności HCV we krwi badanego:
    2. ilościowe, dzięki czemu możliwe jest obliczenie stężenia wirusów i ustalenie stadium choroby. Wynik podano w IU / ml lub kopiach / ml (w zależności od laboratorium);
    3. genotypowanie jest niezbędne do określenia genotypu HCV. Jest to wymagane do dokładnego wyboru leków, które będą najbardziej skuteczne w tym przypadku. Analiza pośrednio wskazuje na nasilenie patologicznego procesu w wątrobie. Tak więc, z trzecim genotypem patogenu najczęściej obserwuje się stłuszczenie, którego rozwojem jest gromadzenie się tłuszczu w hepatocytach (ich komórkach). Ponadto rodzaj wirusa wpływa na wynik i czas trwania kursu terapeutycznego.

    Jakościowa analiza PCR dla zapalenia wątroby typu C

    Pierwszym krokiem w laboratorium jest zbadanie materiału biologicznego pod kątem obecności HCV RNA. Należy pamiętać, że analiza jakościowa zapalenia wątroby typu C ma pewien poziom wrażliwości i dlatego nie zawsze daje właściwą odpowiedź. W takim przypadku zaleca się powtórzenie diagnostyki laboratoryjnej przy użyciu innych odczynników.

    Aby uzyskać wiarygodne wyniki, należy zastosować system testowy o czułości co najmniej 50 IU / ml.

    Wynik diagnozy może być "pozytywny" lub "negatywny". Jeśli patogen nie zostanie wykryty we krwi, badanie kończy się. Po wykryciu czynnika chorobotwórczego w próbce, przeprowadza się następnie ilościową analizę miana wirusa.

    Odpowiedź fałszywie ujemną uzyskuje się, gdy proces technologiczny zostaje przerwany, na przykład, aktywne składniki, które gnębią budowę kopii patogenu przedostają się do środowiska. W związku z tym nie można wyświetlić prawdziwego obrazu krwi, z powodu której nie zdiagnozowano infekcji człowieka.

    Fałszywie dodatni wynik można uzyskać, jeśli probówka do pobierania materiału biologicznego, a także środowisko do badania, zostały zanieczyszczone. Ponadto taka odpowiedź na analizę jest możliwa przy mieszanym zakażeniu, gdy na wątrobę wpływa kilka wirusów, na przykład wirusowe zapalenie wątroby typu C i D.

    Wskazania do badań jakościowych

    Lekarz może przydzielić pacjentowi badanie jakościowe w celu wykrycia RNA wirusa zapalenia wątroby typu C:

    • po otrzymaniu pozytywnej lub wątpliwej odpowiedzi immunotestu enzymatycznego;
    • do weryfikacji diagnozy;
    • określenie miana wirusa;
    • inscenizacja stadium choroby;
    • diagnoza mieszanej infekcji. Często wirusowe zapalenie wątroby typu C atakuje wątrobę w tym samym czasie co wirus "D";
    • określenie taktyki terapeutycznej z uwzględnieniem genotypu patogenu;
    • ocena dynamiki zmian na tle leczenia lekami przeciwwirusowymi.

    Zalety reakcji łańcuchowej polimerazy obejmują:

    1. wysoka czułość techniki, która pozwala ustalić fakt infekcji na etapie przedklinicznym;
    2. identyfikacja materiału genetycznego patogenu, a nie przeciwciał;
    3. możliwość ustalenia podtypu czynnika chorobotwórczego;
    4. wysoka prędkość diagnostyki, ponieważ nie jest konieczne wysiewanie materiału na pożywce, ale wystarczające jest stosowanie określonych układów testowych. Osoba otrzymuje wynik po 5 godzinach;
    5. uniwersalność. Analiza umożliwia identyfikację dowolnego materiału genetycznego (RNA, DNA). Z tego powodu lekarz może potwierdzić zapalenie wątroby typu C i inne rodzaje choroby (B);
    6. możliwość wykrycia utajonej infekcji.

    Badania ilościowe

    W badaniu krwi z reakcją łańcuchową polimerazy możliwe jest obliczenie liczby patogenów w ustalonej objętości materiału biologicznego. Wskaźnik przedstawiono w IU / ml. Dzięki analizie możliwe jest ustalenie stopnia infekcyjności pacjenta, określenie stadium procesu zakaźnego, a także ocena skuteczności terapii lekowej.

    Na podstawie PCR ekspert decyduje, które dawki leków mogą blokować rozprzestrzenianie się patogenów. Ponadto określa się czas trwania leczenia przeciwwirusowego i prognozę na całe życie. Ważne jest, aby pamiętać, że systemy testowe są bardzo czułe, więc metoda ta umożliwia potwierdzenie infekcji u ludzi nawet na etapie przedklinicznym.

    Genotypowanie

    Biorąc pod uwagę zdolność czynnika wywołującego do mutacji, do określenia taktyki leczenia i wyboru leków przeciwwirusowych, potrzebny jest jej genotyp. Na przykład leczenie zapalenia wątroby typu HCV 1 trwa 48 tygodni, z pozytywnym trendem obserwowanym tylko w 60% przypadków. Genotypy 2 i 3 mają bardziej korzystne rokowanie. Leki przeciwwirusowe są przepisywane przez 8 miesięcy, a ich skuteczność sięga 85%.

    Według danych statystycznych, w większości przypadków HCV 1, 2 i 3 są zarejestrowane na terytorium Federacji Rosyjskiej.

    Podczas odczytywania wyników badań laboratoryjnych można wskazać taką odpowiedź - "nie wpisano". Oznacza to, że wirus krąży w układzie krążenia pacjenta, który nie może zostać rozpoznany przez system testowy. Wynik analizy w tym przypadku wskazuje na infekcję osoby nietypowej dla danego obszaru geograficznego czynnika sprawczego.

    Jak uzyskać wiarygodne wyniki?

    Aby jakościowe badania PCR nad wykrywaniem RNA czynnika przyczynowego zapalenia wątroby typu C wykazały prawidłowe wyniki, konieczne jest spełnienie wymagań dotyczących przygotowania do diagnostyki laboratoryjnej:

    1. pobieranie krwi odbywa się na czczo, a "głodna" przerwa nie powinna być krótsza niż 8 godzin;
    2. dwa dni przed badaniem zaleca się zaprzestać picia alkoholu i odmówić dania ostrego, tłustego i wędzonego;
    3. znieść wprowadzenie leków, które zmniejszają krzepliwość krwi, takich jak heparyna. Jeśli te leki są przepisywane z powodów związanych z życiem, należy o tym powiadomić lekarza. Ponadto specjalista powinien być świadomy dopuszczenia innych leków, które mogą wpływać na wynik testu laboratoryjnego;
    4. W przeddzień zebrania materiału biologicznego zabiegi fizjoterapeutyczne nie powinny być wykonywane i poddawane silnemu wysiłkowi fizycznemu.

    Na wyniki analizy może mieć wpływ nie tylko osoba, która oddaje krew, ale także inne czynniki, a mianowicie:

    • uboga krew;
    • nieprzestrzeganie zaleceń dotyczących transportu materiału biologicznego;
    • niewystarczające szkolenie pracowników laboratoriów;
    • nieprzestrzeganie technik badawczych;
    • wprowadzenie antykoagulantów (heparyny) w przeddzień pobierania próbek krwi. Ta grupa leków zmniejsza koagulację, co spowalnia pracę odczynników.

    W różnych laboratoriach odpowiedź diagnostyczna może nieznacznie różnić się, ale błędy te nie wpływają na końcowy wynik badania.

    Szczególną uwagę zwraca się na typy układów testowych stosowanych w laboratorium. Często preferowane są reagenty o wysokiej czułości. Jest to ważne dla pacjentów z małym wirem, ponieważ jest to trudne do wykrycia.

    Jak często wykonywany jest test laboratoryjny?

    Przede wszystkim reakcję łańcuchową polimerazy prowadzi się u osób, które w teście immunologicznym przebadano pod kątem obecności przeciwciał przeciwko wirusowi zapalenia wątroby. W tym przypadku jest on wyznaczony do potwierdzenia faktu zakażenia danej osoby i ustalenia stadium choroby. Ponadto analiza pozwala określić podtyp wirusa, co jest szczególnie ważne przy wyborze leków.

    Kolejny okres obowiązkowych badań laboratoryjnych to 3 miesiące od rozpoczęcia leczenia przeciwwirusowego. Diagnoza daje możliwość oceny skuteczności leków, dostosowania dawki lub zastąpienia ich.

    Oprócz podstawowych analiz PCR można wykonać dodatkowo w 4 i 24 tygodniu od rozpoczęcia leczenia. Pozytywne rokowanie choroby potwierdza zmniejszenie miana wirusa po trzech miesiącach terapii. Na przykład powinna zmniejszyć się z 1 miliona juntów / ml do kilkuset tysięcy.

    Jeśli stężenie czynników chorobotwórczych we krwi pozostaje na tym samym poziomie lub nieznacznie wzrasta, oznacza to nieskuteczność środków antywirusowych i wymaga ich zastąpienia. Przy pomocy PCR po zakończeniu leczenia możliwe jest potwierdzenie powrotu pacjenta do zdrowia.

    Aby prawidłowo zinterpretować wyniki diagnostyki laboratoryjnej, wymagana jest konsultacja z hepatologiem lub specjalistą chorób zakaźnych. Biorąc pod uwagę dużą częstość występowania fałszywych odpowiedzi w teście ELISA, analizę wykorzystuje się wyłącznie do wstępnego badania przesiewowego. W celu dokładniejszego zbadania pacjenta stosuje się reakcję łańcuchową polimerazy.

    Czy nadal uważasz, że ciężko jest wyleczyć zapalenie wątroby typu C?

    Sądząc po tym, że czytasz teraz te słowa - zwycięstwo w walce z chorobą wątroby nie jest po twojej stronie. A już myślałeś o terapii interferonem? Jest to zrozumiałe, ponieważ wirusowe zapalenie wątroby typu C jest bardzo poważną chorobą, ponieważ prawidłowe funkcjonowanie wątroby jest gwarancją zdrowia i dobrego samopoczucia. Nudności i wymioty, żółtawy lub szarawy koloryt skóry, gorycz w jamie ustnej, ciemnienie moczu i biegunka. Wszystkie te symptomy są ci znane nie przez pogłoski.

    Ale może lepiej jest traktować nie konsekwencję, ale powód? Do leczenia zalecamy stosowanie nowoczesnych leków rosyjskich - sophosbuvir i daklatasvir. Czytaj więcej >>


    Pokrewne Artykuły Hepatitis